ככל שהמשקל המולקולרי גדול יותר, כך הסליל ארוך יותר והמולקולה הולכת לאט יותר. אז, אלקטרופורזה + SDS נפרדים על בסיס משקל מולקולרי, לא על בסיס מטען מקומי. הערה חשובה: חלבונים באותו אורך בדרך כלל לא ניתנים להפרדה על ידי אלקטרופורזה ג'ל + SDS.
איך מפרידים חלבונים באותו משקל מולקולרי?
צנטריפוגה, אלקטרופורזה וכרומטוגרפיה הן הטכניקות הנפוצות ביותר לטיהור וניתוח חלבונים. צנטריפוגה מפרידה בין חלבונים על סמך קצב השקיעה שלהם, המושפע מהמסה והצורה שלהם.
אילו טכניקות מפרידות חלבונים על בסיס תשלום?
ניתן להפריד חלבונים על בסיס המטען הנקי שלהם על ידי כרומטוגרפיה של חילופי יונים. אם לחלבון יש מטען חיובי נטו ב-pH 7, הוא בדרך כלל ייקשר לעמודה של חרוזים המכילים קבוצות קרבוקסילטים, בעוד שלחלבון בעל מטען שלילי לא (איור 4.4).
איזו מהטכניקות הבאות הכי מתאימה להפרדת חלבונים על סמך משקל מולקולרי?
שיטות כרומטוגרפיה המבוססות על חלוקה יעילות מאוד בהפרדה, וזיהוי מולקולות קטנות כחומצות אמינו, פחמימות וחומצות שומן. עם זאת, כרומטוגרפיות זיקה (כלומר כרומטוגרפיה של חילופי יונים) יעילות יותר בהפרדה של מקרומולקולות כחומצות גרעין וחלבונים.
איזה סוג עמודהכרומטוגרפיה מפרידה חלבונים על בסיס משקל מולקולרי?
כרומטוגרפיה של ג'ל סינון (GF) מפרידה חלבונים רק על בסיס גודל מולקולרי. ההפרדה מושגת באמצעות מטריצה נקבובית שאליה למולקולות, מסיבות סטרייות, יש דרגות גישה שונות - כלומר, למולקולות קטנות יותר יש גישה גדולה יותר ומולקולות גדולות יותר אינן נכללות מהמטריצה.
