דגירה על הכלי בטמפרטורה ממוזגת למשך 2-3 דקות . ניתן לנתק תאים צמודים היטב במהירות ב-37 °C. התבוננו בתאים במיקרוסקופ. התאים המנותקים נראים מעוגלים ושבירים במיקרוסקופ.
מה קורה אם עושים טריפסין תאים ארוך מדי?
דגירת תאים עם ריכוז טריפסין גבוה מדי לפרק זמן ארוך מדי תפגע בקרום התא ויהרוג את התאים. אם אינך בטוח לגבי ריכוז הטריפסין לשימוש, השתמש בריכוז נמוך.
איך עושים טריפסין תאים?
ניתן להשהות מחדש את התאים על ידי פיפטור בעדינות של תרחיף התאים כדי לפרק את הגושים. ניתן לבצע דילול נוסף, במידת הצורך, עבור ספירת תאים ו/או תת-תרבות.
כמה זמן לוקח לתאים להיצמד?
התאים הראשונים מתחברים כבר אחרי 3-5 דקות! מניסיוני רוב ה-ECs הוצמדו לאחר 10-20 דקות. אבל ככל שאתה מחכה יותר כך ההתקשרות איתנה יותר.
האם זה רע לעשות טריפסיניזציה של תאים יומיים ברציפות?
כן זה מזיק אם אתה עושה טריפסין בתאים שלך ברציפות לאחר 24 שעות של פיצול. רצוי לבצע פיצול לאחר 48 שעות של פיצול. … אתה יכול לשמור על תאים עד שהמורפולוגיה תהיה טובה (זה תלוי בסוג התא שלך, חלק מהתאים יכולים להגיע עד 80 מעברים וחלק עד 10).