חפצי דימר Primer מתרחשים בדרך כלל ב-מספר מחזור סף גדול (בדרך כלל > 35 מחזורים), שהוא גבוה ממספר מחזור הסף עבור האמפליקון הרצוי. דימרי פריימר גדלים באופן ניכר כאשר מוסיפים DNA גנומי הטרולוגי.
איפה הייתם רואים דימרי פריימר על ג'ל DNA?
ב-PCR לא כמותי של נקודת קצה, דימר פריימר יופיע כמריחה קלה פחות או יותר על ג'ל אגרוז, מתחת לרצועת המוצר של עניין.
איך נוצרים דימרי פריימר?
דימרי פריימר נוצרים כאשר שני פריימרים נקשרים זה לזה, במקום ל-DNA של התבנית, עקב אזורים של השלמות פריימר.
איך מזהים דימרי פריימר?
הדרך הקלה ביותר לבדוק primer-dimers היא להשוות את התגובות שלך לבקרה השלילית שלך (מים במקום DNA או RNA). דימרי פריימר עדיין יווצרו בבקרה השלילית. קבוצות פריימר מסוימות נוטות יותר ליצור דימרים מאחרות.
למה מופיעים דימרי פריימר?
בעיקר דימרי פריימר נראים עקב ריכוז גבוה של הפריימר בתערובת תגובת PCR. או אם אין הגברה של PCR ואפשר לראות על פריימר דימר בג'ל אגרוז. אם אתה יכול לראות את תוצר ה-PCR אז אתה יכול להפחית את ריכוז הפריים ולשמור על שאר התנאים זהים.
