אתה יכול גם לבטל את המילח של הדגימה שלך על ידי סינון אולטרה לעשירית מהנפח הקודם, שתדלל שוב וחוזר על שלב UF. השיטה הטובה ביותר להפשרה היא התפלה באמצעות סינון ג'ל כנגד חיץ של 50 mM, מאשר סינון אולטרה (קלאסי, לא צנטריפוגלי).
מהו התפלה בטיהור חלבון?
הסרת המלחה משמשת להסרת מלחים מתמיסות חלבון, פנול או נוקלאוטידים לא משולבים מחומצות גרעין או עודף ריאגנטים צולבים או תיוגים מחלבונים מצומדים.
איך מטהרים חלבונים?
בטיהור חלבון בתפזורת, צעד ראשון נפוץ לבידוד חלבונים הוא משקעים עם אמוניום סולפט (NH4) 2SO4. זה מבוצע על ידי הוספת כמויות הולכות וגדלות של אמוניום גופרתי ואיסוף השברים השונים של החלבון המשקע. לאחר מכן, ניתן להסיר אמוניום גופרתי באמצעות דיאליזה.
איך מחליפים חלבונים במאגר?
עם זאת,
החלפת מאגר מתבצעת על ידי שיווי משקל ראשון עם שרף העמודה עם המאגר שבו הדגימה אמורה להגיע. בשני המקרים, מרכיבי המאגר הנושאים את המדגם לתוך העמודה תוחלף בפתרון שאיתו העמודה מאוזנת מראש.
איזו מטכניקת הכרומטוגרפיה הבאה יכולה להיות מיושמת להפשרה של חלבונים?
כאמור לעיל, סינון ג'ל ניתן לנצל ביעילות לחלבוןהתפלה ומתבצעת על ידי איזון תחילה של עמודת סינון הג'ל במים. עם זאת, החלפת חיץ מתבצעת על ידי איזון תחילה של שרף העמודה עם מאגר היעד.
