חשוב מאוד להיות מודע לכך שהנתונים המופקים באמצעות כתם מערבי נחשבים בדרך כלל ככמותיים למחצה. הסיבה לכך היא שהוא מספק השוואה יחסית של רמות חלבון, אך לא מדד מוחלט של כמות.
האם כתם מערבי הוא איכותי או כמותי?
Western blot הוא שיטה כמותית מהימנה רק אם נלקחים בחשבון מאפיינים ושלמות המדגם, ספציפיות נוגדנים לחלבון היעד ופרוטוקולי טעינה. עם תשומת לב קפדנית לפרטים, תוכל להימנע מטעויות נפוצות ולמנוע פירוש מוטעה של נתוני ה-Western blot.
איזה סוג של שיטה הוא Western blot?
כתם מערבי הוא שיטת מעבדה המשמשת לזיהוי מולקולות חלבון ספציפיות מתוך תערובת של חלבונים. תערובת זו יכולה לכלול את כל החלבונים הקשורים לרקמה או סוג תא מסוים.
האם הכתם המערבי יכול לכמת?
כתמים מערביים מזוהים עם נוגדנים ספציפיים לחלבון המטרה, הידועים כנוגדנים ראשוניים. … עם זאת, ניתן גם להשתמש ב-Western blotting כדי לספק כימות מדויק של חלבונים בדגימות, כדי להעריך שינויים ברמות ביטוי החלבון (2).
האם כתם מערבי יכול לכמת חלבונים?
לאחר תמוגה של תאים, חשוב לקבוע את ריכוז החלבון הכולל של הדגימה. כמות מדויקת של המדגם תאפשר לך לטעון אתכמות נאותה של חלבון בכל נתיב.
